Το αρχαίο θέατρο του Διονύσου βρίσκεται στη νότια κλίτη της Ακρόπολης. Είναι το αρχαιότερο απ' όλα τα γνωστά θέατρα του κόσμου. Στο χώρο αυτό γεννήθηκε το αρχαίο Ελληνικό δράμα, αφού σ' αυτό το θέατρο παρουσίασαν για πρώτη φορά - τον 5ο π.Χ. - αιώνα τα έργα τους οι τέσσερις σημαντικότεροι ποιητές της αρχαιότητας, ο Αισχύλος, ο Ευριπίδης, ο Σοφοκλής και ο Αριστοφάνης κατά τη διάρκεια των ετήσιων δραματικών αγώνων που πραγματοποιούνταν τις ημέρες του εορτασμού των Μεγάλων Διονυσίων.
Το κοίλον και το προσκήνιο (σκηνή) του θεάτρου, αρχικά ήταν κατασκευασμένα από ξύλο. Τον 4ο π.Χ. αιώνα κατασκευάστηκαν εκ νέου από μάρμαρο. Σήμερα, σώζονται τμήματα του λίθινου κοίλου. Στη πρώτη σειρά είχαν χτιστεί 67 συνολικά θρόνοι από Πεντελικό μάρμαρο, που προορίζονταν για τους επίσημους και τους ιερείς. Πάνω από το θέατρο λαξεμένο σε βράχο θα δείτε το χορηγικό μνημείο του Θρασύλλου που χρονολογείται από το 319 π.Χ. και λίγο υψηλότερα από αυτό σώζονται δύο ακόμη χορηγικοί κορινθιακοί κίονες. Το θέατρο του Διονύσου είχε χωρητικότητα 17.000 θεατών.
Την περίοδο της Ρωμαιοκρατίας στο θέατρο πραγματοποιούνταν δημόσιες τελετές. Επίσης, χρησιμοποιήθηκε και σαν αρένα για μονομαχίες. Κατά τη διάρκεια του 1ου αιώνα το δάπεδο της ορχήστρας επενδύθηκε με μαρμάρινες πλάκες και η πρόσοψη του προσκηνίου διακοσμήθηκε με ανάγλυφα όπου απεικονίζονται σκηνές από μύθο του Διονύσου.